Avaliação da influência de diferentes superfícies na adesão e proliferação de osteoblastos humanos

Abstract

Nowadays, the focus of many researches in Implant Dentistry is on the modification of the titanium surface in search of alternatives that can provide more quickness and quality to the osseointegration process. Osseointegration is a phenomenon that happens mainly through the interfacial response of bone cells in contact with the titanium surface. There are different treatment methods that can be used to modify the topographic and chemical properties of the titanium surface in order to optimize the tissue-implant reactions. In this study, we evaluated the influence of different titanium surface treatments in the adhesion and proliferation of human osteoblasts by quantitatively analyzing the number of adherent cells in different cell culture periods. Forty level II titanium disks with 15mm diameter and 1mm thickness were divided into four groups according to their surface characterization: G1. machined; G2. acid-etched; G3. with hydroxyapatite coating; and G4. with bisphosphonate immobilized on hydroxyapatite coating. Osteoblast cells derived from human osteosarcoma (SaOS-2) were cultured on the disks and the cell counting was made in 3, 7 and 14 days. To determine the number of cells, a coloring process of the nucleus using propide iodide was carried out and disks were then analyzed in an optical microscope under ultraviolet light. The cell counting in the different experimental groups and culture periods was compared using ANOVA complemented by Tukey’s test. Results of the statistical analysis made it possible to conclude that: (1) the titanium surface and the cell culture period, as well as the interaction of both, significantly affect the cell growth; (2) modifying the titanium surface by acid-etching favors the adhesion and proliferation of human osteoblasts, in vitro. Further researches are necessary to elucidate the immobilized bisphosphonate influence on the titanium surface at the initial osteogenesis events.

Atualmente, o foco de muitas pesquisas científicas em Implantodontia está voltado para a modificação da superfície do titânio na busca de alternativas que proporcionem maior rapidez e qualidade no processo de osseointegração. A osseointegração é um fenômeno que acontece fundamentalmente através da resposta interfacial das células ósseas em contato com a superfície do titânio. Diferentes métodos de tratamento podem ser utilizados para modificar as propriedades topográficas e químicas da superfície do titânio a fim de otimizar as reações tecido-implante. Neste estudo foi avaliada a influência de diferentes tratamentos de superfície do titânio na adesão e proliferação de osteoblastos humanos, através da análise quantitativa do número de células aderidas em diferentes períodos de cultura celular. Para isso, 40 discos de titânio grau II, comercialmente puro, de 15mm de diâmetro e 1mm de espessura, foram divididos em quatro grupos conforme a caracterização de sua superfície: G1. maquinada; G2. ácido-condicionada; G3. com cobertura de hidroxiapatita; e G4. com bisfosfonato imobilizado na cobertura de hidroxiapatita. Células osteoblásticas derivadas de osteossarcoma humano (SaOS-2) foram cultivadas sobre os discos e a contagem celular foi realizada em 3, 7 e 14 dias. Para determinação do número de células, um processo de coloração dos núcleos com Iodeto de Propídio foi realizado, e os discos foram analisados em microscópio óptico sob luz ultravioleta. As contagens celulares nos diferentes grupos experimentais e períodos de cultura foram comparadas por meio de ANOVA, complementado pelo teste de Tukey. Os resultados da análise estatística permitem concluir que: (1) a superfície do titânio e o período de cultura celular, bem como a interação de ambos, significativamente afetam o crescimento celular; (2) a modificação na superfície do titânio através de condicionamento ácido favorece, in vitro, a adesão e proliferação de osteoblastos humanos. Mais pesquisas são necessárias para elucidar a influência do bisfosfonato imobilizado na superfície do titânio nos eventos iniciais da osteogênese.